日本TSK凝膠色譜柱是在一根不銹鋼空心細(xì)管中加入孔徑不同的微粒作為填料。每根色譜柱都有一定的相對分子質(zhì)量分離范圍和滲透極限,日本TSK凝膠色譜柱有使用的上限和下限。
日本TSK凝膠色譜柱的使用上限是當(dāng)聚合物zui小的分子的尺寸比色譜柱中zui大的凝膠的尺寸還大,這時(shí)高聚物進(jìn)入不了凝膠顆??讖?,全部從凝膠顆粒外部流過,這就沒有達(dá)到分離不同相對分子質(zhì)量的高聚物的目的。而且還有堵塞凝膠孔的可能,影響色譜柱的分離效果,降低其使用壽命。
日本TSK凝膠色譜柱的使用下限就是當(dāng)聚合物中zui大尺寸的分子鏈比凝膠孔的zui小孔徑還要小,這時(shí)也沒有達(dá)到分離不同相對分子質(zhì)量的目的。
日本TSK凝膠色譜柱分離原理
讓被測量的高聚物溶液通過一根內(nèi)裝不同孔徑的日本TSK凝膠色譜柱,柱中可供分子通行的路徑有粒子間的間隙和粒子內(nèi)的通孔(較?。?。當(dāng)聚合物溶液流經(jīng)色譜柱時(shí),較大的分子被排除在粒子的小孔之外,只能從粒子間的間隙通過,速率較快;而較小的分子可以進(jìn)入粒子中的小孔,通過的速率要慢得多。經(jīng)過一定長度的色譜柱,分子根據(jù)相對分子質(zhì)量被分開,相對分子質(zhì)量大的在前面(即淋洗時(shí)間短),相對分子質(zhì)量小的在后面(即淋洗時(shí)間長)。自試樣進(jìn)柱到被淋洗出來,所接受到的淋出液總體積稱為該試樣的淋出體積。
當(dāng)儀器和實(shí)驗(yàn)條件確定后,溶質(zhì)的淋出體積與其分子量有關(guān),分子量愈大,其淋出體積愈小。